上海富衡生物科技有限公司

收到的细胞脱落了?碎片多?黑点多?具体分析

 收货时,细胞脱落

01

 

 

有些细胞本身贴壁不牢,很容易造成细胞脱落(如293系列,TM3,TM4,Raw264.7,原代内皮细胞,原代平滑肌细胞)。

 

另外,运输过程中受到碰撞或气温过低,也可能导致细胞脱落。

 

处理办法

① 将脱落细胞进行离心收集,并在离心管中消化

② 仍然贴壁的细胞,按照常规方法加入胰酶或其他解离剂消化。

③ 再将消化好的脱落细胞和贴壁细胞混合,按比例接种到新的培养器皿中。

 

常温运输的C2C12细胞收货时发现脱落常温运输的C2C12细胞收货时发现脱落

▲ 常温运输的C2C12细胞收货时发现脱落细胞

 

C2C12细胞处理后第二天

▲C2C12细胞处理后第二天,

有少量漂浮细胞

C2C12细胞处理后第四天

▲C2C12细胞处理后第四天,

细胞正常生长

(图片由客户提供,仅供学习参考)

 

 收货时,细胞皱缩

02

 

 

运输过程中,路途颠簸加上温度不稳定,常温细胞会发生回缩。

 

处理办法

放入培养箱静置2-4小时,若4小时后仍然没有伸展,延长静置时间。注意,过夜静置时,需倒出部分培养基,留5-10mL在瓶中,瓶盖拧松透气,保持气体交换(L15培养体系除外)。

若有脱落细胞,需离心收集。

 

SH-SY5Y细胞发货前状态

 

SH-SY5Y细胞收货后状态

▲SH-SY5Y细胞收货后状态
(客户提供)

SH-SY5Y细胞收货时

▲ SH-SY5Y细胞收货时

皱缩、脱落

SH-SY5Y细胞

▲ SH-SY5Y细胞

处理后第三天

(图片由客户提供,仅供学习参考)

 

收货时,细胞黑点较多

03

 

 

当受到运输环境影响时,细胞会发生应激反应,分泌活动增加,导致分泌蛋白增多,呈黑色圆球状,分布无规律。

 

同时,路途中凋亡的细胞碎裂后将产生细胞碎片,为黑色或透明色,呈不规则状,分布无规律。

 

另外,有些细胞本身分泌活动较强,培养时常伴随黑点。

 

处理办法

贴壁细胞放培养箱静置2-4小时后,正常换液或传代;

悬浮细胞800~1000rpm(约160~200g) 低速离心3min去除细胞碎片。通常培养数天后,细胞状态会逐渐稳定下来。

 

KYSE-30细胞收货时

KYSE-30细胞收货时

观察到细胞碎片

KYSE-30细胞继续

▲ KYSE-30细胞继续

培养后细胞碎片减少

(图片由客户提供,仅供学习参考)

 

小贴士:遇到小黑点问题时,首先要排除微生物污染,再按以上办法解决哦~

 

细胞碎片/分泌物和微生物污染的区别

 

_

细胞碎片/分泌物

微生物污染

形态

大小不一的黑色圆点,不规则形状

圆球状或杆状,

形态非常规则

是否运动

原地震动,布朗运动

或相对液体静止

快速游动,快速转圈或

相对液体静止

分布情况

视野中分布无规律

视野中分布均匀

增长情况

无抗生素条件下

不增多或缓慢增多

无抗生素条件下

48-72小时内爆发式增多

 

 

细胞专线

点击这里给我发消息

技术服务

点击这里给我发消息

试剂耗材

点击这里给我发消息

文章课题

点击这里给我发消息

售后服务

点击这里给我发消息

订单详情

点击这里给我发消息