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如何让支原体远离你的细胞

据粗略估计,大约三分之一的细胞培养物都感染了支原体。这些小东西神不知鬼不觉,侵入你的细胞。由于它们体积小,生长缓慢,所以难以察觉。但是,它们的存在又确实改变了细胞的代谢过程,继而干扰你的实验结果,或造成无法解释的差异。更糟的是,拯救被感染的细胞几乎是不可能的任务。因此,就支原体污染而言,预防是第一要务。下面介绍了一些简单的预防措施,也许对你有用。
细胞来源是关键
支原体污染的最常见原因之一是引入的培养物已经被感染。一旦进入实验室,这些小东西会蔓延到每个角落,让你崩溃。要避免这种情况,最简单的办法就是不从其他实验室要细胞,而从供应商或菌种保藏中心(ATCC或ECACC)购买,这些细胞经过严格检测,确保不含有支原体。
如果购买有难度,或基于其他原因,不得不使用其他实验室的细胞,那么也要保持警惕,在单独的培养箱中隔离,同时进行支原体的检测。上海瑞鹿生物科技公司提供多种支原体检测试剂盒,可联系咨询自行选择。
定期检测很重要
即使实验室没有新来的细胞,支原体也可能通过操作人员传递到现有的培养物。当然,操作人员并不知道。支原体污染的另一条路线是通过你的细胞培养试剂。培养基、酶这些常用试剂,也有可能被支原体污染。
尽管无法完全避免人或试剂的污染,但常规检测也能避免情况恶化。也许,当支原体初次感染时,我们未必能检测到,但尽早发现,就能防止这种微生物的传播,避免大的损失。
支原体检测有很多种。直接培养方法虽然准确率高,但需要三到四周的时间。因此,我们在常规检测中使用间接检测方法已足够,若发现阳性,则后续可采用较为繁琐的直接检测。常见的间接检测方法有基于酶活性的荧光和生化分析、PCR分析、免疫分析等。
无菌操作要做好
支原体污染的另一个主要源头是无菌操作不佳。尽管良好的操作可能是最简单的预防措施,但说起来容易,做起来难。每个人都会犯错,特别是在重复劳动时。因此,实验室应不定期开展培训和监督,以便让每个人都充分认识到支原体的破坏性。
许多实验室目前仍使用抗生素,但细胞培养人员逐渐认识到这是不负责任的,因为它带来了耐药微生物的问题。相反,最好依赖自身的无菌操作来预防支原体,而只有在怀疑或确认感染的时候才使用抗生素。
保藏细胞防万一
最后,通过低温保藏储备一些细胞,以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象,或常规检测呈阳性结果,那么最可靠的补救措施是扔掉所有培养物,清洁培养箱和超净台,一切从头开始。当然,你得确保储备的细胞是不含支原体的。

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