上海富衡生物科技有限公司

荧光素酶标记试剂盒

一. 试剂盒说明

   荧光素酶(Luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称,其中最有代表性的是来自北美萤火虫(Photinus pyralis)体内的荧光素酶。萤火虫荧光素酶属于加氧酶(oxygenase),其发光反应需要O2和Mg2+参与;有辅酶A(CoA)存在时能提高反应效率,增加发光时间。萤火虫荧光素酶无需翻译后修饰,即可表现出荧光素酶活性。本产品将萤火虫荧光素酶的基因插入慢病毒介导的载体中,通过CAG启动子过表达从而作为报告基因,在细胞中表达。常用于细胞标记后小动物细胞移植活体成像追踪,从而评估移植后细胞的归巢以及治疗效果等。

二.试剂盒组份

组份

Cat:

储存条件

萤光素酶标记液

1 ml

4 ℃

polybrene

8 μg/ml

4℃

 

三. 注意事项

萤光素酶标记液避免反复冻融,操作时要戴手套和口罩。该产品仅限于非临床性科研使用。

四. 操作步骤

细胞传代培养到6孔板或者6cm盘中12-16小时后,将萤光素酶标记液0.3ml(6孔板)或者0.5ml(6cm盘)分别与新鲜细胞培养液混匀,比例为0.3ml萤光素酶标记液中加入0.7ml新鲜培养液和1.0μl polybrene(终浓度8ng/ml),0.5ml萤光素酶标记液中加入1.5ml新鲜培养液和2μl polybrean(终浓度8ng/ml)。预混好的萤光素酶标记液加入到目的细胞培养皿中,此时细胞密度不宜超过60%。2个小时之内每间隔15-30min轻轻晃动被标记的细胞培养皿,可以达到更好的标记效果,2小时之后培养皿中补充等体积的新鲜培养液,过夜培养后更换成新鲜培养液。48h之后,利用Progema公司生产的萤光素酶检测试剂盒检测标记效果。

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